Durante a pandemia global, além do desenvolvimento da Covid-19, o desenvolvimento da vacina é outro foco de atenção das pessoas. Instituições científicas em todo o mundo estão acelerando o desenvolvimento de vacinas para conter o coronavírus, que ainda se espalha. Sabe-se que mais de 180 países e regiões se comprometeram a aderir ao “Plano de Implementação de Vacinas do Novo Coronavírus”, cobrindo 90% da população mundial. Atualmente, quatro tipos de vacinas COVID-19 receberam autorização de uso de emergência em vários países e regiões, uma das quais é a vacina de vetor de adenovírus recombinante.

Vetor de adenovírus

Processo de produção e solução de vacina de adenovírus coronavírus recombinante

A produção de uma vacina de vetor de adenovírus recombinante segue vários processos, desde a cultura celular, inoculação do vírus, amplificação e coleta de fluido viral, até o isolamento, purificação e preparação da vacina. O processo de produção é mostrado na imagem abaixo.

De acordo com o processo de produção acima, TRUKING fornece uma solução completa cobrindo quatro processos, ou seja, processo de cultura upstream, processo de separação e purificação downstream, processo de preparação de mídia e processo de preparação de buffer.

Processo de Cultura Upstream

A linha celular HEK 293 é usada para a produção de vacina recombinante. A principal vantagem dessa linhagem celular é que ela cresce em suspensão em cultura de células, um processo simples que pode ser ampliado diretamente.

O processo de amplificação celular aumenta de estágio a estágio de 50L, 200L a 1000L. O biorreator série BR da TRUKING com design de mistura razoável tem bom controle de oxigênio dissolvido e CO2, minimizando o impacto do corte físico no crescimento celular (incluindo velocidade) e realizando efeito de cultura ideal e título de replicação de vírus.

Um dos problemas na otimização da produção de adenovírus é o efeito da densidade celular. Para a vacina de vetor de adenovírus recombinante, o título do vírus está intimamente relacionado à viabilidade celular, e a quantidade de antígeno da vacina está obviamente relacionada à densidade celular. O biorreator da série BR TRUKING tem um maior rendimento durante a cultura de células HEK293, pois otimiza as condições de infecção, as condições de cultura e o tempo de colheita. A densidade celular após a otimização é de até 1 × 107 células / ml, 1012 VP, IU: VP <100, e a produção de vírus de um único HEK293 é de 5000 IU / célula.

Separação downstream de alta eficiência e tecnologia de purificação

A solução de vírus colhida por meio de cultura a montante precisa ser purificada para atender a três requisitos: a) a pureza da vacina é mais de 90% sem polímeros; b) o conteúdo de DNA e proteína devem atender aos requisitos da farmacopéia; c) a solução original pode ser preservada de forma estável sem agregação e degradação. Em princípio, o melhor processo de purificação pode atingir um alto rendimento abrangente com poucas etapas de purificação.

O processo de purificação a jusante da vacina recombinante inclui lise, clarificação, ultrafiltração e concentração, cromatografia em duas etapas, ultrafiltração e filtração de esterilização.

TRUKING fornece uma solução completa para isolamento e purificação, incluindo sistema de filtração profunda, sistema de autocromatografia, coluna de autocromatografia, estação de carregamento automático, sistema de homogenato, sistema de ultrafiltração e sistema de filtração antibacteriana.

O sistema de cromatografia TRUKING (AutoPrep) possui as seguintes características: a) software de controle estável e amigável, desenvolvido na mesma plataforma do sistema de ultrafiltração; b) os componentes são modularizados e o caminho do fluxo é propositalmente projetado para que os líquidos fluam da posição inferior para a posição superior para facilitar a eliminação de bolhas, e a área morta no sistema de tubulação de 10L é inferior a 100ml; c) tubulações não soldadas eliminam riscos de ferrugem e risco de vazamento, e feedback de válvula e outros projetos de segurança estão em vigor; d) a eficiência da coluna foi validada para ser melhor do que a dos principais fornecedores internacionais.

Teste de fita VB12

Teste Coluna

Sistema de preparo multiestágio

De acordo com a configuração da oficina e programação de produção, TRUKING pode calcular o volume, tipo e tempo de meio de cultura necessário para cultura upstream e amplificação, e o volume e tipo de solução tampão necessária para purificação downstream.

A TRUKING pode projetar e fazer o layout do sistema de preparação do meio de acordo com o cálculo do material do processo de produção, o cronograma de produção e o layout real da fábrica.

Conclusão

Como o adenovírus é uma tecnologia de plataforma que pode atingir alta expressão com qualidade controlável, ele suporta P&D e preparação rápida de vacinas e vários medicamentos de terapia genética. A solução total da TRUKING desenvolvida para vacina de vetor de adenovírus recombinante e terapia gênica de vetor de adenovírus oferece forte garantia para a produção de vacinas Covid-19 e drogas de terapia genética.